24 Horas é uma série em tempo real: cada episódio, com uma hora de duração, mostra uma hora na vida do ex-agente secreto Jack Bauer, da CTU - Unidade Anti-Terrorismo de Los Angeles - na luta contra os inimigos do país. Cada temporada se passa em apenas um dia, o tempo que Jack tem para impedir que ações terroristas aconteçam em solo americano.
Nada nem ninguém é empecilho para Jack atingir seus objetivos, nem que para isso ele precise torturar e matar.Na primeira temporada, a mulher e a filha de Jack Bauer, que é agente da CTU, são sequestradas por terroristas que querem obrigá-lo a matar o senador David Palmer, candidato à presidência dos EUA. Existe um traidor dentro da CTU ajudando os terroristas, e Jack descobre que quem está no comando deles é um homem que fez parte de seu passado.
O segundo pior dia da vida de Jack Bauer começa um ano e meio depois do primeiro. A mulher de Jack está morta e sua filha se afastou dele. Ele havia abandonado a CTU, mas quando a Casa Branca recebe a ameaça de uma bomba nuclear em Los Angeles, é a ele a quem o presidente Palmer vai recorrer.
Três anos depois da segunda temporada, Jack retorna de um trabalho sob disfarce em que se infiltrou entre chefões do tráfico de drogas - e, como parte do disfarce, ele acaba se viciando em heroína. Jack tem um novo parceiro, Chase, que é namorado de sua filha Kim - agora uma funcionária da CTU. Há uma ameaça da liberação de um vírus mortal, e Jack precisa lutar contra isso.
Na quarta temporada, Jack trabalha para o secretário de Defesa dos EUA, James Heller, e namora com a filha dele, Audrey. O novo chefe de Jack é seqüestrado por terroristas, mas isso é apenas parte de um plano muito maior. Jack é obrigado a voltar a trabalhar com a CTU para ajudar a conter a ameça de um míssil que vai ser lançado sobre Los Angeles.
Jack começa a quinta temporada vivendo sob disfarce com uma família no interior da Califórnia - todos acreditam que ele esteja morto. As únicas quatro pessoas que sabiam que Jack estava vivo sofrem atentados. Ele é obrigado a sair de seu disfarce para ajudar nas investigações e impedir a liberação do mortal gás Sentox em território americano, e acaba descobrindo que gente da própria Casa Branca está envolvida com terroristas.